Thử nghiệm Coagulase trên Vi khuẩn để tìm ra Khả năng đông máu của chúng (Có hình)

Thử nghiệm Coagulase trên Vi khuẩn để tìm ra Khả năng đông máu của chúng (Có hình)!

Nguyên tắc:

Các chủng vi khuẩn Staphylococcus gây bệnh có chứa enzyme coagulase, hoạt động bên trong, các mô chủ để chuyển fibrinogen thành fibrin.

Các lưới fibrin được hình thành bao quanh các tế bào vi khuẩn hoặc các mô bị nhiễm bệnh, bảo vệ vi khuẩn khỏi các cơ chế kháng thuốc không đặc hiệu của vật chủ, như thực bào và hoạt động chống tụ cầu của huyết thanh bình thường.

Enzyme này cũng giúp đông máu trong vật chủ bằng cách là tiền chất của chất giống như thrombin, làm đông máu hoặc đông máu. Xét nghiệm coagulase được thực hiện để phân biệt giữa coagulase dương tính (gây bệnh hoặc độc lực) và coagulase âm tính (không gây bệnh hoặc avirulent) Staphylococcus.

Trong xét nghiệm coagulase, huyền phù của các loài Staphylococcus thử nghiệm được trộn với huyết tương và huyết tương tiêm sau đó được kiểm tra định kỳ để hình thành hoặc đông máu fibrin.

Sự hình thành cục máu đông trong vòng bốn giờ được hiểu là kết quả dương tính và là dấu hiệu của chủng Staphylococcus có độc tính (gây bệnh). Sự vắng mặt của đông máu sau 24 giờ ủ là kết quả âm tính, cho thấy một chủng độc lực (không gây bệnh).

Vật liệu thiết yếu:

Động vật trong phòng thí nghiệm (thỏ hoặc chuột lang), ống tiêm, thuốc chống đông máu (natri citrat hoặc heparin), ống lấy máu, máy ly tâm, ống nghiệm, trượt, vòng tiêm, đốt bunsen, buồng chảy tầng, lọ thuộc chi Staphylococcus.

Thủ tục:

1. Ống tiêm và ống lấy máu được rửa bằng dung dịch natri citrat hoặc heparin, để tránh đông máu ngay sau khi lấy (Hình 7.24).

2. Với sự trợ giúp của ống tiêm, máu được thu thập từ các động vật thí nghiệm như thỏ hoặc chuột lang và đưa vào các ống thu thập.

3. Máu được ly tâm ở 3000 vòng / phút trong 15 phút trong máy ly tâm.

4. Chất nổi trên mặt (huyết tương) được thu thập vào một ống nghiệm có thành phần khác và phần còn lại (tế bào máu) bị loại bỏ.

(a) Phương pháp trượt:

1. Hai giọt huyền phù của vi khuẩn thử nghiệm thuộc chi Staphylococcus, được đặt trên hai nửa chia đều của một slide với sự trợ giúp của một vòng tiêm chủng. Một giọt được sử dụng như 'kiểm soát' để xem liệu vi khuẩn có bị vón cục hay không và giọt còn lại được sử dụng làm 'thử nghiệm'.

2. Đến 'giọt thử nghiệm', một giọt plasma thu được được thêm vào, trộn và ủ ở nhiệt độ phòng.

3. Các giọt được quan sát tại các khoảng thời gian hàng giờ lên đến 4 giờ.

(b) Phương pháp ống:

1. Hai ống nghiệm nhỏ được lấy. Một ống nghiệm được đánh dấu là 'thử nghiệm' và 'ống nghiệm' khác. Trong mỗi ống nghiệm, 0, 5 ml huyền phù vi khuẩn được lấy.

2. Đến ống 'thử nghiệm', 1 ml huyết tương được thêm vào, trộn và ủ

3. Các ống được quan sát tại các khoảng thời gian hàng giờ lên đến 4 giờ.