Thí nghiệm thực hiện nhuộm vi khuẩn cơ bản để quan sát hình dạng, kích thước và sự sắp xếp của nó

Nhằm thực hiện nhuộm vi khuẩn cơ bản đơn giản, để quan sát hình dạng, kích thước và sự sắp xếp của nó.

Mục đích:

Không thể quan sát hình dạng tự nhiên, kích thước và sự sắp xếp của vi khuẩn bằng cách nhuộm màu cơ bản, vì những đặc điểm này bị biến dạng bởi sự cố định nhiệt.

Bên cạnh đó, một số vi khuẩn (ví dụ như spirilli) rất khó bị nhuộm màu.

Do đó, nhuộm màu được thực hiện vì hai lý do như sau:

(a) Để quan sát hình dạng tự nhiên, kích thước và sự sắp xếp của vi khuẩn, vì không có sự cố định nhiệt được thực hiện ở đây.

(b) Để quan sát những vi khuẩn, những gì khó bị nhuộm màu?

Nguyên tắc:

Các tế bào vi khuẩn mang điện tích âm trên bề mặt của chúng, do chúng được bao quanh bởi các cation, chẳng hạn như Na ⁺ và K ⁺ (Hình 5.9). Trong nhuộm axit, một vết axit được sử dụng, ion hóa thành một nhiễm sắc thể anion (ion nhuộm tích điện âm) và một cation.

Các nhiễm sắc thể tích điện âm bị đẩy lùi bởi các điện tích âm bề mặt trên các tế bào vi khuẩn, do đó thuốc nhuộm không thể xâm nhập vào tế bào. Bây giờ, các ô không màu dễ dàng nhận thấy trên nền màu.

Vật liệu thiết yếu:

Slides, vòng lặp, vết axit (eosin / nigrosin), nước dùng / tấm / nuôi cấy vi khuẩn, kính hiển vi, dầu ngâm.

Thủ tục:

1. Một phiến kính được làm sạch đúng cách dưới vòi nước, sao cho nước không còn như giọt trên bề mặt của nó (Hình 5.10).

2. Nước kết dính được quét sạch bằng giấy thấm và slide được làm khô bằng không khí.

3. Một giọt nhỏ của vết axit (nigrosin / eosin) được đặt gần một đầu của slide.

4. Một vòng lặp được khử trùng trên ngọn lửa và làm mát. Về mặt vô trùng, một vòng vi khuẩn từ đĩa thạch hoặc xiên hoặc một vòng huyền phù của vi khuẩn từ nước dùng lỏng được chuyển sang giọt vết bẩn. Việc đình chỉ vi khuẩn trong vết bẩn được thực hiện bằng cách trộn nhẹ vòng lặp của vi khuẩn trong giọt vết bẩn, theo cách đó, giọt nước không lan rộng.

5. Một slide sạch khác được giữ ở góc 30 ° so với slide đầu tiên, theo cách mà một cạnh hẹp của trước chạm vào bề mặt sau về phía cuối mà không có vết bẩn.

6. Ở vị trí nghiêng đó, slide thứ hai được kéo về phía vết rơi, cho đến khi cạnh của nó chạm vào điểm rơi và giọt được lan dọc theo cạnh của nó.

7. Ở vị trí nghiêng đó, slide thứ hai được đẩy lùi để tạo thành một vệt mỏng của vi khuẩn.

8. Vết bẩn được sấy khô trong không khí. Cố định nhiệt không được thực hiện ở đây.

9. Slide được cắt theo giai đoạn của kính hiển vi và vết bẩn được quan sát dưới các mục tiêu năng lượng thấp và khô cao.

10. Một giọt dầu ngâm được đưa vào vết bẩn.

11. Vết bẩn được quan sát dưới mục tiêu ngâm dầu.