Chuẩn bị núi vi khuẩn ướt để quan sát hình dạng và kích thước tự nhiên của nó

Nhằm chuẩn bị thú cưỡi ướt của vi khuẩn, để quan sát hình dạng, kích thước và sự sắp xếp tự nhiên của nó trong điều kiện sống.

Mục đích:

Các tế bào vi khuẩn có thể được nhìn thấy dễ dàng và rõ ràng, khi được nhuộm màu bởi các vết bẩn, nhưng trong hầu hết các quá trình nhuộm, các tế bào chết và mất hình dạng và kích thước tự nhiên do cố định nhiệt cũng như do tiếp xúc với hóa chất (vết bẩn, axit và rượu).

Mục đích của thí nghiệm này là quan sát hình dạng tự nhiên, kích thước và sự sắp xếp của vi khuẩn trong điều kiện sống. Tính linh hoạt không thể được quan sát trong giá đỡ ướt, vì các ô được ấn giữa slide và nắp trượt.

Nguyên tắc:

Trong giá treo ướt, một giọt huyền phù vi khuẩn được đặt trên một phiến kính, được che bằng một tấm che và quan sát dưới kính hiển vi ghép hoặc tốt nhất là dưới kính hiển vi trường tối hoặc tương phản pha sử dụng vật kính ngâm dầu.

Vật liệu thiết yếu:

Trượt thủy tinh, trượt nắp, thạch dầu mỏ, dầu ngâm (dầu len tuyết tùng hoặc parafin lỏng), nuôi cấy vi khuẩn (trên môi trường rắn hoặc huyền phù lỏng), vòng và kính hiển vi (hợp chất, trường tối hoặc tương phản pha).

Thủ tục:

1. Một slide được làm sạch đúng cách dưới nước máy, sao cho nước không còn như giọt trên bề mặt của nó (Hình 5.2).

2. Slide được làm khô bằng cách lau bằng giấy thấm và sau đó di chuyển trên ngọn lửa hoặc giữ dưới ánh mặt trời.

3. Nếu vi khuẩn đã được phát triển trên môi trường rắn (như nuôi cấy nghiêng hoặc nuôi cấy bằng đĩa), một giọt nước cất được đặt ở trung tâm của slide. Một vòng lặp được khử trùng bằng cách đun nóng trên ngọn lửa đến nóng đỏ. Nó được làm mát đến nhiệt độ phòng. Sau đó, vô trùng một phần nhỏ nuôi cấy vi khuẩn được quét qua vòng lặp và chuyển vào giọt nước.

Việc đình chỉ vi khuẩn được thực hiện bằng cách trộn nhẹ vòng lặp của vi khuẩn trong giọt nước, theo cách đó, giọt không lan rộng. Nếu được trồng trong môi trường lỏng dưới dạng huyền phù, một cách vô trùng một giọt huyền phù vi khuẩn được đặt trực tiếp vào tâm trượt, sử dụng vòng khử trùng bằng ngọn lửa.

4. Thạch dầu hoặc vật liệu tương tự được áp dụng xung quanh giọt nước, do đó, khi trượt nắp che đi sự rơi, sự bay hơi và ảnh hưởng của dòng không khí được giảm thiểu.

5. Một tấm che được giữ ở vị trí nghiêng gần giọt huyền phù vi khuẩn với một cạnh chạm vào slide.

6. Từ từ trượt nắp được hạ xuống, cho đến khi nó chạm vào bề mặt của giọt.

7. Sau đó, phiếu che được giải phóng, do đó giọt vi khuẩn lơ lửng lan ra theo mọi hướng dưới tấm che. Cần cẩn thận, để không có bọt khí được hình thành trong huyền phù.

8. Slide được cắt trên sân khấu của kính hiển vi ghép và được quan sát bằng cách sử dụng các mục tiêu năng lượng thấp và khô cao. Sau đó, một giọt dầu ngâm được đặt trên tấm che và quan sát bằng cách sử dụng vật kính ngâm trong kính hiển vi. Tốt hơn là nên sử dụng kính hiển vi tương phản pha hoặc trường tối để quan sát rõ ràng.