Phương pháp hóa học đánh giá thuốc

Xác định thành phần hoạt tính trong thuốc theo quy trình hóa học được gọi là đánh giá hóa học.

(a) Kiểm tra các ancaloit:

tôi. Kiểm tra Mayer:

Thử nghiệm mẫu và thêm thuốc thử Mayer (dung dịch kali ioduric iodua) cho kết tủa dạng kem, sự hiện diện của các alcaloid.

ii. Kiểm tra Wagner:

Thử nghiệm mẫu và thêm thuốc thử Wagner (dung dịch iốt nước) cho kết tủa màu nâu đỏ.

iii. Kiểm tra Dragendorffs:

Kiểm tra mẫu và thêm thuốc thử Dragendorffs (dung dịch kali bismuth iodide) cho kết tủa màu nâu đỏ.

iv. Thử nghiệm Hagar:

Thử mẫu và thêm thuốc thử của Hager (dung dịch axit picric bão hòa) cho kết tủa màu vàng.

(b) Kiểm tra glycoside:

(i) Các xét nghiệm tìm glycoside saponin:

a. Kiểm tra bọt:

Lắc chiết xuất thuốc hoặc bột khô mạnh mẽ với nước. Bọt liên tục quan sát.

b. Xét nghiệm tan máu:

Thêm chiết xuất thuốc hoặc bột khô vào một giọt máu đặt trên phiến kính. Khu vực tan máu xuất hiện.

(ii) Kiểm tra anthraquinone glycoside:

a. Bài kiểm tra của Borntranger:

Thuốc được đun sôi với axit sulfuric loãng, được lọc và làm lạnh. Dịch lọc được chiết bằng cloroform hoặc benzen và amoniac loãng được thêm vào nó. Lớp ammonical chuyển sang màu hồng sang đỏ do sự hiện diện của dẫn xuất anthraquinones.

(iii) Xét nghiệm hóa học đối với glycoside tim:

a. Bài kiểm tra của Raymond:

Để thuốc, thêm một vài ml ethanol 50% và 0, 1 ml dung dịch m-dinitrobenzene 1% trong ethanol. Để giải pháp này, thêm 2-3 giọt dung dịch natri hydroxit 20%. Màu tím xuất hiện, điều này là do sự hiện diện của nhóm methylene hoạt động.

b. Kiểm tra pháp lý:

Để thuốc, thêm vài ml pyridine và 2 giọt nitroprusside và một giọt dung dịch natri hydroxit 20%. Một màu đỏ đậm được sản xuất.

c. Thử nghiệm Killer killiani:

Glycoside được hòa tan trong hỗn hợp dung dịch sắt sunfat 1% trong (5%) axit axetic băng. Thêm một hoặc hai giọt axit sulfuric đậm đặc. Một màu xanh phát triển do sự hiện diện của đường deoxy.

d. Thử nghiệm Xanthydrol:

Dầu thô được đun nóng với dung dịch Xanthydrol 0, 1 đến 5% trong axit axetic băng có chứa axit clohydric 1%. Một màu đỏ được tạo ra do sự hiện diện của 2-deoxysugar.

e. Kiểm tra Baljet:

Lấy một miếng lamina hoặc phần dày của lá và thêm thuốc thử natri picrate. Nếu glycoside có màu vàng đến màu cam sẽ được nhìn thấy.

f. Kiểm tra Kedde:

Một dung dịch glycoside được xử lý bằng một lượng nhỏ thuốc thử Kedde (Trộn các thể tích bằng nhau của dung dịch 2% 3, 5 axit dinitrobenzoic trong tinh dầu bạc hà và dung dịch KOH 7, 5%). Sự phát triển của màu xanh lam hoặc tím nhạt dần sau 1 đến 2 giờ cho thấy sự hiện diện của cardinoloids.

(c) Các xét nghiệm cho tannin:

tôi. Xét nghiệm gelatin:

Để dung dịch tanin, dung dịch gelatin và natri clorua được thêm vào. Một kết tủa màu trắng được hình thành.

ii. Thử nghiệm da của Goldbeater:

Một miếng da Goldbeater nhỏ (màng được chuẩn bị từ ruột của một con bò) được ngâm trong axit clohydric 20%, đổ vào nước cất và đặt vào dung dịch tanin trong 5 phút. Các mảnh da được rửa bằng nước cất và giữ trong dung dịch sắt sunfat. Một màu nâu hoặc đen được sản xuất trên da do sự hiện diện của tannin.

(d) Kiểm tra carbohydrate:

tôi. Kiểm tra molish:

Để 5 ml dung dịch mẫu trong ống nghiệm, thêm 2 giọt thuốc thử molish (dung dịch 5% của α-naphthol trong rượu). Trộn kỹ. Làm nghiêng ống và cho phép khoảng 3 ml H ₂ SO ₄ đậm đặc chảy xuống ống bên, do đó tạo thành một lớp axit bên dưới đường. Một vùng màu tím đỏ xuất hiện ở điểm nối giữa hai chất lỏng.

ii. Thử nghiệm Fehling:

Lấy dung dịch Fehling (A + B) trong ống nghiệm, thêm dung dịch mẫu và đun sôi. Sự hình thành kết tủa của oxit cuppy màu nâu đỏ, sự hiện diện của đường khử

iii. Bài kiểm tra Benedict:

Lấy dung dịch mẫu và thêm thuốc thử benedict, trộn đều, đun sôi hỗn hợp mạnh trong hai phút. Để tạo ra kết tủa màu đỏ, vàng hoặc xanh lá cây, sự hiện diện của đường khử.

iv. Xét nghiệm iốt:

Dung dịch mẫu và thêm dung dịch iốt để tạo ra sự hiện diện màu xanh của polysacarit.

(e) Kiểm tra lipid:

tôi. Thử nghiệm Salkowski:

Mẫu hòa tan trong cloroform và thêm thể tích bằng H ₂ SO ₄ đậm đặc. Để tạo ra màu đỏ xanh đến màu anh đào đến màu đỏ anh đào

ii. Thử nghiệm Liebermann Bicksard:

Mẫu được hòa tan trong cloroform trong ống nghiệm khô. Thêm vài giọt anhydrid axetic và vài giọt H ₂ SO ₄ đậm đặc. Dung dịch trở thành màu đỏ, sau đó là màu xanh lam và cuối cùng là màu xanh lục.

(f) Kiểm tra protein:

tôi. Xét nghiệm sinh học:

Để 2-3 ml dung dịch mẫu trong ống nghiệm và thêm thể tích dung dịch NaOH 10% bằng nhau, trộn kỹ và thêm 0, 5% dung dịch đồng sunfat từng giọt bằng cách trộn giữa các giọt, cho đến khi có màu tím nhạt hoặc tím nhạt được sản xuất.

Phương pháp định lượng hóa học đánh giá:

Các hằng số hóa lý định lượng như giá trị axit, giá trị iốt, giá trị acetyl, giá trị hydroxyl và giá trị xà phòng hóa, vv được sử dụng cho dầu và mỡ cố định.

(i) Giá trị axit:

Giá trị axit là số mg kali hydroxit cần thiết để trung hòa axit tự do trong 1 g chất.

Xác định giá trị axit:

Cân chính xác khoảng 10 g chất vào bình 250 ml và thêm 50 ml hỗn hợp rượu có thể tích bằng nhau và ete dung môi đã được trung hòa sau khi thêm 1 ml dung dịch phenolphtalein.

Đun nóng nhẹ trên nồi cách thủy, nếu cần, cho đến khi chất này tan chảy hoàn toàn, chuẩn độ bằng kali hydroxit 0, 1N, lắc liên tục cho đến khi thu được màu hồng trong 15 giây. Lưu ý số ml cần thiết.

Tính giá trị axit từ công thức sau:

Giá trị axit = ax 0, 00561 x 1000 / w

a = Số ml kali hydroxit 0, 1 N cần thiết

w = Trọng lượng tính bằng g của chất được lấy.

Thí dụ:

(i) Sáp ong vàng: 5- 8

(ii) Dầu thầu dầu: không ít hơn 2

(iii) Dầu gan cá mập: Không quá 2

(ii) Giá trị xà phòng hóa:

Giá trị Saponization là số mg kali hydroxit cần thiết để trung hòa axit béo, kết quả từ quá trình thủy phân hoàn toàn 1 g dầu hoặc chất béo.

Xác định giá trị xà phòng hóa:

Cân chính xác khoảng 2 g chất trong bình 250 ml đã được tẩm nhựa, thêm 25 ml dung dịch kali hydroxit có cồn, gắn bình ngưng phản xạ và đun sôi trên nồi cách thủy trong một giờ thường xuyên xoay nội dung của bình; làm nguội và thêm 1 ml dung dịch phenolphtalein và chuẩn độ lượng kiềm dư bằng axit clohydric 0, 5 N.

Tính giá trị xà phòng hóa từ công thức sau:

Giá trị xà phòng hóa = (b - a) x 0, 02805 x 1000 / w

W = Trọng lượng tính bằng g của chất được lấy.

Thí dụ:

(i) Dầu gan cá mập: 150-200

(ii) Dầu hạt lanh: 188-196

(iii) Mỡ: 192 đến 198

(iii) Giá trị iốt:

Giá trị iốt là số, biểu thị bằng gam lượng Iốt, được hấp thụ bởi 100 g chất.

Xác định giá trị Iốt:

Phương pháp Iochine Monochloride:

Đặt chất, cân chính xác, trong bình iốt khô; thêm 10 ml carbon trichloride và hòa tan. Thêm 20 ml dung dịch Iodine Monochloride vào nút đậy đã được làm ẩm trước đó bằng dung dịch kali iodua và để yên trong một nơi tối ở nhiệt độ khoảng 17 ° trong 30 phút.

Thêm 15 ml dung dịch kali iodua và 100 ml nước; lắc và chuẩn độ bằng dung dịch natri thiosunfat 0, 1N, sử dụng dung dịch tinh bột làm chất chỉ thị. Lưu ý số ml cần thiết (a).

Đồng thời thực hiện thao tác chính xác, theo cách tương tự, nhưng không có chất được thử, và lưu ý số ml natri thiosulphate 0, 1 N cần thiết (b).

Giá trị tạm dừng Giá trị axit = (ba) x 0, 01269 x 100 / w

W = trọng lượng tính bằng gm của chất được lấy

Thí dụ:

(i) Dầu ô liu: 79-88

(Ii) Arachisoil: 85- 100

(iii) Dầu mè: 103-116

(iv) Dầu gan cá: 155-180

(v) Arachisoil: 84-100

Giá trị axetyl:

Số mg KOH cần trung hòa axit axetic được giải phóng khỏi quá trình thủy phân 1 g chất acetyl hóa và xác định giá trị Sapon hóa.

Xác định giá trị Acetyl:

Acetyl hóa:

Lấy 10 g chất này với 20 ml anhydrid axetic trong bình đáy tròn 200 ml, phản xạ, đun nóng trên amiăng trên ngọn lửa được kiểm soát. Đun sôi nhẹ nhàng trong 2 giờ, để nguội, đổ vào 600 ml nước trong cốc lớn, thêm 0, 2 g bột đá bọt và đun sôi trong 30 phút, để nguội, chuyển vào thiết bị phân tách.

Hủy lớp dưới. Rửa sản phẩm đã acetyl hóa bằng 3 x 50 ml dung dịch NaCl đã được làm ấm và kiểm tra không có axit bằng litmus. Cuối cùng lắc với 20 ml nước và loại bỏ lớp nước hoàn toàn nhất có thể.

Đổ chất acetyl hóa vào một cái đĩa nhỏ, thêm 1 g natri sunfat khan, khuấy kỹ và lọc qua giấy lọc khô. Xác định giá trị xà phòng hóa của chất acetyl hóa.

Giá trị acety = (ba) x 1335/1335 - a

a = Giá trị xà phòng hóa của chất.

b. Giá trị xà phòng hóa của chất acetyl hóa.

Giá trị hydroxyl:

Giá trị hydroxyl là số miligam kali hydroxit cần thiết để trung hòa axit kết hợp bằng cách acyl hóa trong 1 gm chất.

Xác định giá trị hydroxyl:

Để chỉ định lượng chất, thêm 12 g anhydrid stearic và 10 xylen, đun nóng nhẹ trong hồi lưu trong 30 phút, để nguội, thêm hỗn hợp 40 ml pyridine và 4 ml nước và hồi lưu trong 30 phút nữa. chuẩn độ dung dịch nóng bằng N NaOH bằng chỉ thị phenolphtalein. Lặp lại mà không có chất.

Giá trị hydroxyl có thể được tính từ các mục sau:

Giá trị hydroxyl = vx 56.11 / w

V = khác nhau giữa hai phép chuẩn độ

B = trọng lượng (g) của chất.

Ví dụ: dầu mầm lúa mì: 10-48

Giá trị Ester:

Số mg KOH cần trung hòa các axit do thủy phân hoàn toàn 1 g chất.

Xác định giá trị Ester:

Quá trình hóa

Đun sôi một lượng ethanol 95% để loại bỏ CO ₂ hòa tan và trung hòa bằng phenolphtalein.

Cân 2 g chất, hòa tan trong 5 ml rượu trung hòa và trung hòa đến 0, 1 N bằng KOH cồn, số lượng trong đó nên nhiều hơn gấp đôi lượng chất được uống. Sử dụng 0, 2 ml chỉ thị phenolphtalein cho mục đích này.

Thêm 25 ml KOH cồn (0, 5 N), phản xạ trong 1 giờ. Thêm 20 ml nước và chuẩn độ lượng kiềm dư bằng HCl 0, 5N bằng cách sử dụng thêm 0, 2 ml phenolphtalein. Lặp lại quy trình không có chất.

Sự khác biệt giữa hai giá trị chuẩn độ thu được cho giá trị của kiềm cần thiết để xà phòng hóa este.