Những lưu ý hữu ích về Enzyme Papain và Enzyme Pepsin
Globulin miễn dịch là protein và thường chống lại sự tiêu hóa bởi các enzyme.
Tuy nhiên, enzyme papain và pepsin phân cắt các phân tử immunoglobulin. Các mảnh được tạo ra bởi papain và pepsin rất hữu ích cho các nghiên cứu về cấu trúc và chức năng của immunoglobulin. Nhưng vị trí phân cắt của hai loại enzyme này là khác nhau (Hình 9.5).
Hình 9.5: Sơ đồ phân mảnh protein của immunoglobulin bằng cách xử lý ngắn gọn với enzyme papain và pepsin.
Enzyme papain tách immunoglobulin ở đầu N của liên kết disulfide chuỗi liên nặng và tạo ra ba mảnh (hai mảnh Fab và một mảnh Fc). Enzyme pepsin tách immunoglobulin ở vùng đầu C và tạo ra một đoạn lớn (chứa hai vùng Fab) được gọi là F (ab ') 2 . Các chuỗi nặng còn lại ở phía đầu C được tiêu hóa thành nhiều peptide nhỏ
1. Enzyme Papain:
Enzyme papain tách vùng bản lề ở phía đầu N của các disulfua chuỗi nặng và điều này dẫn đến sự hình thành của ba mảnh. (Hai mảnh chứa vùng biến và một mảnh chứa vùng C H 2 và C H 3). Hai mảnh chứa vùng biến được gọi là; Các mảnh Fab, (tức là liên kết kháng nguyên mảnh) vì chúng có các vị trí gắn kháng nguyên.
Đoạn thứ ba bao gồm các phần đầu cuối carboxyl của cả hai chuỗi nặng được tổ chức bởi các disulfide. Nói chung, cấu trúc của đoạn thứ ba là giống hệt nhau cho nhiều phân tử immunoglobulin khác nhau.
Do đó các mảnh của các loại này có thể được kết tinh ngay cả khi chúng bao gồm nhiều loại globulin miễn dịch khác nhau. Vì vậy, đoạn này được gọi là đoạn kết tinh hoặc đoạn Fc. Hầu hết các đặc tính sinh học thứ cấp của immunoglobulin phụ thuộc vào các trình tự trong khu vực Fc. Ngoài ra đây là khu vực được công nhận bởi các thụ thể Fc trên nhiều loại tế bào.
2. Enzyme Pepsin:
Enzyme pepsin tách immunoglobulin ở phía đầu cuối của hộp carboxy của vùng bản lề dẫn đến một mảnh lớn gọi là F (ab ') 2 . F (ab ') 2 có hai mảnh Fab được liên kết bởi các liên kết disulfide. Vùng Fc bị suy giảm nghiêm trọng bởi pepsin và thường không còn mảnh Fc nào còn nguyên sau khi tiêu hóa pepsin.
