Thử nghiệm Catalase trên vi khuẩn để tìm ra khả năng phân hủy Hydrogen Peroxide (có hình)
Thử nghiệm Catalase trên Vi khuẩn để tìm ra khả năng phân hủy Hydrogen Peroxide (Có hình)!
Nguyên tắc:
Một số vi khuẩn có khả năng phân giải hydro peroxide (H 2 0 2 ) thành nước (H 2 O) và oxy (0, ), vì chúng có thể tạo ra enzyme 'catalase'.
Sự phân hủy hydro peroxide bởi catalase được biểu thị bằng các bong bóng khí oxy tự do (0, ).
Trong thử nghiệm catalase, một vòng lặp của vi khuẩn thử nghiệm được đưa vào một giọt hydro peroxide được lấy trên một phiến kính. Nếu vi khuẩn có khả năng sản xuất catalase, nó sẽ phá vỡ hydro peroxide (H 2 O 2 ) thành nước và oxy. Sản xuất oxy dẫn đến sủi bọt hoặc tạo bọt, có thể nhận thấy trong giọt.
Vật liệu thiết yếu:
Các slide, giấy kinh thánh, vòng tiêm chủng, đầu đốt bunsen, buồng dòng chảy tầng, hydro peroxide (3%), các khuẩn lạc phân lập hoặc nuôi cấy vi khuẩn thuần túy.
Thủ tục:
1. Một phiến kính được làm sạch dưới vòi nước (Hình 7.18).
2. Slide được lau bằng giấy kinh thánh và sấy khô trong không khí.
3. Một giọt hydro peroxide (3%) được lấy ở trung tâm của slide.
4. Một vòng lặp của vi khuẩn thử nghiệm được lấy một cách vô trùng, tốt nhất là trong buồng dòng chảy tầng, với sự trợ giúp của vòng khử trùng ngọn lửa và được đưa vào giọt hydro peroxide trên phiến kính. Các vòng lặp được khử trùng sau mỗi lần tiêm chủng.
Quan sát:
1. Bong bóng hoặc sủi bọt xảy ra trong giọt: Catalase dương tính.
2. Bong bóng hoặc tạo bọt không xảy ra trong giọt: Catalase âm tính.
Biện pháp phòng ngừa:
Không thể sử dụng nuôi cấy vi khuẩn từ môi trường thạch máu để xét nghiệm catalase, vì máu có chứa catalase và nó luôn cho kết quả dương tính. Vi khuẩn âm tính Catalase có xu hướng chết trong môi trường không có đường vì chúng tạo ra H 2 0 2 hoặc do H 2 0 2 tích lũy trong môi trường, khi chúng tiếp xúc với không khí và ánh sáng.
Do đó, nuôi cấy vi khuẩn như vậy nên được lưu trữ trong bóng tối và nơi tiếp cận với không khí bị hạn chế. Catalase được tìm thấy ở hầu hết các vi khuẩn có thể phát triển trên không. Vì enzyme chỉ được sản xuất bởi vi khuẩn khả thi, nên nuôi cấy trên 24 giờ tuổi để thử nghiệm catalase.
