29 Phòng thí nghiệm vi sinh nên có

Nhằm mục đích nghiên cứu Nguyên lý làm việc và Vận hành Thiết bị được sử dụng trong Phòng thí nghiệm Vi sinh. Một phòng thí nghiệm vi sinh hiện đại nên được trang bị các thiết bị sau đây.

1. Lò nướng không khí nóng để khử trùng:

Nó được sử dụng để khử trùng các dụng cụ thủy tinh, chẳng hạn như ống nghiệm, pipet và đĩa petri. Khử trùng khô như vậy chỉ được thực hiện cho đồ thủy tinh. Các chất lỏng, như môi trường pha chế và dung dịch muối không thể được khử trùng trong lò, vì chúng bị mất nước do bay hơi.

Các dụng cụ thủy tinh được khử trùng ở 180 ° C trong 3 giờ. Một lò nướng (Hình 3.2) có bộ điều khiển nhiệt, sử dụng nhiệt độ không đổi cần thiết có thể đạt được bằng thử và sai. Việc đọc quay số nhiệt là gần đúng và nhiệt độ chính xác được đọc bằng cách đưa nhiệt kế vào lò hoặc trên nhiệt kế hình chữ L tích hợp.

Trong một lò hiện đại (Hình 3.3), có một màn hình hiển thị nhiệt độ kỹ thuật số và bộ điều khiển nhiệt độ tự động để dễ dàng đặt nhiệt độ mong muốn. Thời gian được thiết lập bởi một bộ đếm thời gian kỹ thuật số. Sau khi tải đồ thủy tinh, cửa được đóng lại và bật lò.

Nhiệt độ yêu cầu được đặt. Sau khi lò đạt được nhiệt độ cài đặt, thời gian khử trùng cần thiết được đặt trên bộ hẹn giờ. Lò sẽ tự động tắt sau thời gian đã đặt. Lò được mở, chỉ sau khi nhiệt độ của nó xuống gần đến nhiệt độ phòng. Mặt khác, nếu cửa được mở, trong khi bên trong lò vẫn còn rất nóng, không khí lạnh có thể ùa vào và làm vỡ đồ thủy tinh.

2. Lò sấy:

Để chuẩn bị một số thuốc thử, dụng cụ thủy tinh, sau khi làm sạch và rửa đúng cách bằng nước cất, được yêu cầu sấy khô. Chúng được sấy khô bên trong lò sấy ở 100 ° C cho đến khi đồ thủy tinh khô hoàn toàn.

3. Nồi hấp:

Nồi hấp là hạt nhân của phòng thí nghiệm vi sinh. Nó không chỉ được sử dụng để khử trùng các chất lỏng như dung dịch pha chế và dung dịch muối (chất pha loãng) mà còn để khử trùng dụng cụ thủy tinh khi cần thiết.

Nó có nguyên tắc làm việc tương tự như một nồi áp suất trong nước. Nhiệt độ tối đa có thể đạt được bằng cách đun sôi nước trong một thùng chứa mở là 100 ° C (điểm sôi của nước).

Nhiệt độ này đủ để giết chết các chất tạo bào tử không bào tử, nhưng rất khó để tiêu diệt vi khuẩn hình thành bào tử ở nhiệt độ này, vì chúng thoát ra bằng cách hình thành bào tử chịu nhiệt. Phải mất rất nhiều thời gian để tiêu diệt các bào tử ở nhiệt độ này.

Mặt khác, khi nước được đun sôi trong một bình chứa kín, do áp suất bên trong nó tăng lên, nhiệt độ sôi tăng lên và nhiệt độ hơi nước vượt quá 100 ° C. Nhiệt độ cao này là cần thiết để tiêu diệt tất cả các vi khuẩn bao gồm các chất tạo bào tử chịu nhiệt. Nhiệt độ hơi nước tăng khi tăng áp suất hơi (Bảng 3.1).

Bảng 3.1: Nhiệt độ đạt được ở các áp suất hơi khác nhau:

Khi vận hành nồi hấp dọc tiêu chuẩn, (Hình 3.4) đủ nước được đổ vào nó. Nếu nước quá ít, đáy nồi hấp sẽ bị khô trong quá trình gia nhiệt và làm nóng thêm.

Nếu nó có bộ phận làm nóng nước bên trong, thì nên duy trì mực nước (Hình 3.5) trên phần tử. Mặt khác, nếu có quá nhiều nước, phải mất nhiều thời gian để đạt được nhiệt độ cần thiết.

Các vật liệu được khử trùng được phủ bằng giấy thủ công và được sắp xếp trên khung nhôm hoặc gỗ được giữ dưới đáy nồi hấp, nếu không, nếu các vật liệu vẫn ngập một nửa hoặc nổi, chúng sẽ rơi xuống trong quá trình đun sôi và nước có thể rơi vào. Nồi hấp được đóng kín hoàn toàn kín khí chỉ giữ cho van xả hơi mở.

Sau đó, nó được làm nóng trên ngọn lửa hoặc bởi các yếu tố làm nóng được xây dựng. Không khí bên trong nồi hấp phải được thoát hoàn toàn qua van này. Khi hơi nước được nhìn thấy thoát qua van, nó được đóng lại.

Nhiệt độ và áp suất bên trong ngày càng tăng. Sự gia tăng áp lực được quan sát trên mặt số áp lực. Thông thường khử trùng được thực hiện ở 121 ° C (áp suất 15 pounds mỗi inch vuông tức là 15 psi) trong 15 phút. Thời gian cần thiết được xem xét từ điểm, khi đạt được áp suất nhiệt độ yêu cầu.

Khi đạt được áp suất nhiệt độ yêu cầu, nó được duy trì bằng cách kiểm soát nguồn nhiệt. Sau thời gian quy định (15 phút), ngưng gia nhiệt và van xả hơi mở ra. Nếu mở hoàn toàn ngay lập tức, do áp suất giảm đột ngột, chất lỏng có thể tràn ra khỏi các thùng chứa.

Dần dần, việc giải phóng hơi nước được mở ra ngày càng nhiều, để cho phép tất cả hơi nước thoát ra. Nồi hấp chỉ được mở sau khi áp suất giảm trở lại áp suất khí quyển bình thường (0 psi). Nồi hấp không bao giờ nên được mở, khi vẫn còn áp lực bên trong. Các vật liệu tiệt trùng nóng được loại bỏ bằng cách giữ chúng bằng một miếng vải sạch hoặc găng tay phủ amiăng.

Trong trường hợp nồi hấp nằm ngang có hơi nước, nồi hơi tạo ra hơi nước (Hình 3.6). Nó được giải phóng ở một áp suất được chỉ định, vào khoang bên ngoài (áo khoác). Không khí được phép thoát ra và sau đó van xả hơi của nó được đóng lại.

Áo nóng làm nóng khoang bên trong, do đó làm nóng các vật liệu cần khử trùng. Điều này ngăn chặn sự ngưng tụ hơi nước trên các vật liệu. Bây giờ, hơi nước dưới áp suất được giải phóng từ áo khoác vào khoang bên trong và không khí được phép thoát ra khỏi nó.

Sau đó, van xả hơi của nó được đóng lại. Hơi nước dưới áp suất trong buồng bên trong đạt đến nhiệt độ vượt quá 100 ° C, có thể khử trùng các vật liệu được giữ bên trong nó. Nồi hấp cũng có hệ thống tắt tự động tức là trừ khi nhiệt độ và áp suất xuống gần với điều kiện phòng, cửa không thể mở được.

Bên cạnh quay số áp suất, nó cũng có quay số nhiệt độ riêng biệt để chỉ ra nhiệt độ bên trong buồng bên trong. Hơn nữa, nồi hấp tự động duy trì nhiệt độ và áp suất và tắt sau thời gian khử trùng đã đặt.

4. Vườn ươm vi sinh:

Tăng trưởng lợi nhuận của vi khuẩn thu được trong phòng thí nghiệm bằng cách trồng chúng ở nhiệt độ thích hợp. Điều này được thực hiện bằng cách cấy vi khuẩn mong muốn vào môi trường nuôi cấy phù hợp và sau đó ủ nó ở nhiệt độ tối ưu cho sự phát triển của nó.

Việc ủ được thực hiện trong tủ ấm (Hình 3.7), duy trì nhiệt độ không đổi đặc biệt phù hợp với sự phát triển của một loại vi khuẩn cụ thể. Vì hầu hết các vi khuẩn gây bệnh cho con người phát triển mạnh mẽ ở nhiệt độ cơ thể của người bình thường (ví dụ 37 ° C), nhiệt độ ủ thông thường là 37 ° C.

Máy ấp trứng có bộ điều chỉnh nhiệt, duy trì nhiệt độ không đổi, được đặt theo yêu cầu. Việc đọc nhiệt độ trên bộ điều chỉnh nhiệt là gần đúng. Nhiệt độ chính xác có thể được nhìn thấy trên nhiệt kế cố định trên lò ấp. Nhiệt độ chính xác, theo yêu cầu, được đặt bằng cách xoay núm điều chỉnh nhiệt bằng cách thử và lỗi và lưu ý nhiệt độ trên nhiệt kế.

Hầu hết các máy ấp trứng hiện đại (Hình 3.8) đều có thể lập trình được, không cần cài đặt nhiệt độ thử và lỗi. Ở đây, người vận hành đặt nhiệt độ mong muốn và khoảng thời gian cần thiết.

Các vườn ươm tự động duy trì nó cho phù hợp. Độ ẩm được cung cấp bằng cách đặt một cốc nước vào lồng ấp trong thời kỳ sinh trưởng. Một môi trường ẩm làm chậm sự mất nước của môi trường và do đó, tránh kết quả thí nghiệm giả.

5. Vườn ươm BOD (Vườn ươm nhiệt độ thấp):

Một số vi khuẩn sẽ được trồng ở nhiệt độ thấp hơn cho các mục đích cụ thể. Vườn ươm nhiệt độ thấp BOD (Hình 3.9), có thể duy trì nhiệt độ từ 50 ° C đến thấp đến 2-3 ° C được sử dụng để ủ trong những trường hợp như vậy.

Nhiệt độ mong muốn không đổi được đặt bằng cách xoay núm của bộ điều chỉnh nhiệt. Xoay núm điều chỉnh nhiệt di chuyển kim trên mặt số hiển thị nhiệt độ gần đúng. Nhiệt độ yêu cầu chính xác thu được, bằng cách xoay núm tốt bằng cách thử và sai và lưu ý nhiệt độ trên nhiệt kế cố định trên lò ấp.

Hầu hết các lò ấp BOD hiện đại (Hình 3.10) đều có thể lập trình được, không cần cài đặt nhiệt độ thử và lỗi. Ở đây, người vận hành đặt nhiệt độ mong muốn và khoảng thời gian cần thiết. Các vườn ươm tự động duy trì nó cho phù hợp.

6. Tủ lạnh (Tủ lạnh):

Nó phục vụ như một kho lưu trữ hóa chất bền nhiệt, dung dịch, kháng sinh, huyết thanh và thuốc thử sinh hóa ở nhiệt độ lạnh và thậm chí ở nhiệt độ dưới 0 (dưới 0 ° C). Nuôi cấy vi khuẩn cũng được lưu trữ trong đó giữa các giai đoạn nuôi cấy phụ. Nó cũng được sử dụng để lưu trữ phương tiện tiệt trùng, để ngăn ngừa mất nước.

7. Tủ lạnh sâu:

Nó được sử dụng để lưu trữ hóa chất và bảo quản mẫu ở nhiệt độ dưới 0 rất thấp.

8. Cân bằng chảo điện tử:

Nó được sử dụng để cân một lượng lớn phương tiện truyền thông và các hóa chất khác, trong đó việc cân chính xác không quan trọng lắm.

9. Cân phân tích điện tử:

Nó được sử dụng để cân một lượng nhỏ hóa chất và mẫu một cách chính xác và nhanh chóng.

10. Cân phân tích hai chảo:

Nó được sử dụng để cân hóa chất và mẫu chính xác. Cân nặng mất nhiều thời gian hơn, chỉ được sử dụng trong trường hợp khẩn cấp.

11. Nhà máy nước cất:

Nước được sử dụng trong điều chế môi trường và thuốc thử. Nếu môi trường được chuẩn bị bằng nước máy, các tạp chất hóa học có trong nó có thể cản trở sự phát triển của vi sinh vật trong môi trường. Hơn nữa, hàm lượng vi khuẩn trong môi trường càng cao, thời gian khử trùng của chúng càng lâu và cơ hội sống sót của một số vi khuẩn càng cao.

Nước cất, mặc dù không có vi khuẩn, nhưng chứa ít vi khuẩn hơn. Đó là lý do tại sao; nó được ưa thích trong việc chuẩn bị môi trường vi sinh. Nó cũng được sử dụng trong điều chế thuốc thử, vì các tạp chất hóa học có trong nước máy có thể cản trở hoạt động đúng của hóa chất thuốc thử.

Vì sản xuất nước cất bằng thiết bị ngưng tụ Liebig là một quá trình mất nhiều thời gian, trong hầu hết các phòng thí nghiệm, nó được điều chế bởi 'các nhà máy nước cất'. Thông thường một nhà máy nước cất được làm bằng thép hoặc đồng thau. Nó cũng được gọi là nước cất vẫn còn.

Nó có một đầu vào được kết nối với vòi nước và hai đầu ra, một đầu vào để nước cất thả vào thùng chứa và một đầu vào để chảy ra nước làm mát nóng vào bồn. Các vẫn được cài đặt trên tường. Nó được làm nóng bởi các yếu tố làm nóng điện được xây dựng (lò sưởi ngâm).

Vẫn hoạt động hiệu quả, khi nước chảy vào được điều chỉnh đến mức, nhiệt độ của nước làm mát chảy ra từ tĩnh vào bồn không quá cao cũng không quá thấp tức là nước ấm nên chảy ra. Nước cất có thể chứa dấu vết kim loại bị ăn mòn từ thùng thép hoặc đồng thau.

Để có được nước cất không có kim loại, thiết bị chưng cất thủy tinh được sử dụng và tốt hơn nữa là thiết bị chưng cất thạch anh. Tuy nhiên, đối với phòng thí nghiệm vi sinh, một thiết bị chưng cất bằng thép hoặc thủy tinh là đủ. Để phân tích chính xác, nước cất hai hoặc ba lần được sử dụng.

12. Hệ thống lọc nước Ultrapure:

Đối với các công việc phân tích chính xác, ngày nay, thay vì sử dụng nước cất hai hoặc ba lần, nước lọc vi sinh được sử dụng. Trong trường hợp nước cất, có khả năng, một số chất dễ bay hơi có trong nước bị bay hơi trong quá trình đun nóng nước và sau đó được ngưng tụ vào nước cất thu được.

Vì vậy, có thể có dấu vết của các chất như vậy trong nước cất. Để khắc phục điều này, nước siêu tinh khiết được sử dụng. Ở đây, nước được phép đi qua các lỗ chân lông siêu nhỏ rất mịn, giữ lại các hạt lơ lửng siêu nhỏ bao gồm cả các vi khuẩn.

Sau đó, nước đi qua hai cột nhựa trao đổi ion. Nhựa trao đổi anion hấp phụ các chú thích có trong nước, trong khi nhựa trao đổi chú thích hấp phụ các anion. Nước chảy ra vô cùng tinh khiết.

13. Đồng nhất:

Để phân tích vi sinh, các mẫu chất lỏng được sử dụng trực tiếp, trong khi các mẫu rắn phải được trộn kỹ với chất pha loãng (thường là nước muối sinh lý), để có được huyền phù đồng nhất của vi khuẩn. Việc đình chỉ này được cho là có chứa vi khuẩn đồng nhất.

Việc trộn các mẫu rắn và chất pha loãng được thực hiện bởi một chất đồng nhất, trong đó một động cơ quay một bánh công tác với lưỡi sắc nét ở tốc độ cao bên trong cốc đồng nhất kín có chứa mẫu và chất pha loãng. Nó có một bộ điều chỉnh tốc độ để kiểm soát tốc độ quay của bánh công tác.

Trong một số phòng thí nghiệm trộn được thực hiện thủ công bằng chày và cối tiệt trùng. Trong các phòng thí nghiệm hiện đại, một túi dùng một lần được sử dụng, trong đó mẫu chất rắn và chất pha loãng lỏng được đặt vô trùng và trộn cơ học bằng hành động nhu động của máy trên túi. Máy này được gọi là stomacher.

14. Máy đo pH:

Máy đo pH là một công cụ để xác định độ pH của môi trường lỏng, mẫu chất lỏng và chất đệm. Nó có một điện cực pH thủy tinh. Khi không sử dụng, nên giữ một nửa ngâm trong nước chứa trong cốc nhỏ và tốt nhất là được đậy bằng bình chuông để tránh bụi tích tụ trong nước và mất nước do bay hơi.

Trước khi sử dụng, máy đo được hiệu chuẩn bằng hai dung dịch đệm chuẩn pH đã biết. Thông thường bộ đệm pH 4.0, 7.0 và 9.2 có sẵn trên thị trường. Nhạc cụ được bật và để trong 30 phút để làm nóng. Núm hiệu chỉnh nhiệt độ được xoay theo nhiệt độ của các dung dịch có pH được đo.

Sau đó, điện cực được nhúng vào bộ đệm (pH 7, 0). Nếu số đọc không phải là 7.00, thì núm hiệu chỉnh pH được xoay cho đến khi số đọc là 7.00. Sau đó, điện cực được nhúng vào một bộ đệm khác (pH 4.0 hoặc 9.2).

Nếu số đọc giống với độ pH của bộ đệm được sử dụng, thiết bị hoạt động tốt. Mặt khác, điện cực được kích hoạt bằng cách nhúng vào 0, 1 N HC1 trong 24 giờ. Sau khi hiệu chuẩn, độ pH của các mẫu được xác định bằng cách nhúng điện cực vào chúng và lưu ý đến số đọc.

Mỗi lần, trước khi nhúng vào bất kỳ dung dịch nào, điện cực phải được rửa sạch bằng nước cất. Các mẫu không được chứa bất kỳ vật liệu dính lơ lửng nào, có thể tạo thành một lớp phủ trên đầu điện cực và làm giảm độ nhạy của nó.

Máy đo pH mẫu cũ có điện cực kép (một trong số chúng đóng vai trò là điện cực tham chiếu), trong khi mẫu mới có điện cực kết hợp đơn. Hơn nữa, để khắc phục vấn đề điều chỉnh nhiệt độ, giờ đây có sẵn máy đo pH với hiệu chỉnh nhiệt độ tự động.

Ở đây, một "điện cực nhiệt độ" khác cũng được đưa vào dung dịch cùng với điện cực pH, đo nhiệt độ của dung dịch và tự động điều chỉnh ảnh hưởng của các biến đổi nhiệt độ.

Máy đo pH tinh vi có điện cực gel đơn. Các điện cực như vậy có rất ít cơ hội bị phá vỡ, vì chúng gần như được bao bọc hoàn toàn trong một vỏ nhựa cứng ngoại trừ ở đầu. Đầu có cả cảm biến pH và nhiệt độ.

Hơn nữa, chúng rất dễ bảo trì, vì chúng không cần nhúng liên tục vào nước cất, vì đầu điện cực được đóng bằng nắp nhựa chứa dung dịch kali clorua bão hòa, khi không sử dụng. Tuy nhiên, trong quá trình chuẩn bị môi trường vi sinh, pH được xác định bằng giấy pH phạm vi hẹp và được điều chỉnh theo độ pH cần thiết bằng cách thêm axit hoặc kiềm theo yêu cầu.

15. Tấm nóng:

Tấm nóng được sử dụng để làm nóng hóa chất và thuốc thử. Tấm nóng được làm bằng một tấm sắt, được làm nóng bởi một bộ phận làm nóng bằng điện từ bên dưới. Mức độ cần thiết của hệ thống sưởi được lấy bởi một bộ điều chỉnh.

16. Tắm nước lắc:

Đôi khi, sưởi ấm ở nhiệt độ rất chính xác là cần thiết. Nhiệt độ chính xác như vậy không thể có được trong lò ấp hoặc lò nướng, trong đó nhiệt độ dao động, mặc dù hơi. Tuy nhiên, nhiệt độ chính xác có thể được duy trì trong một bể nước, cung cấp nhiệt độ ổn định.

Một bồn nước bao gồm một thùng chứa nước, được làm nóng bằng các bộ phận làm nóng bằng điện. Nhiệt độ nước cần thiết có được bằng cách tăng hoặc giảm tốc độ gia nhiệt bằng cách xoay bộ điều nhiệt bằng thử và sai.

Trong một bể nước lắc, chất này được làm nóng ở nhiệt độ yêu cầu và đồng thời, nó bị lắc liên tục. Lắc được thực hiện bởi một động cơ, nó quay và di chuyển các container đến và đi trong mỗi vòng quay. Tốc độ rung lắc một lần nữa được kiểm soát bởi một bộ điều chỉnh. Lắc lắc kích thích các chất và tăng cường tốc độ của quá trình.

Hầu hết các phòng tắm nước hiện đại đều có thể lập trình và không cần cài đặt nhiệt độ thử và sai. Nhiệt độ nước mong muốn có thể được duy trì trong một khoảng thời gian mong muốn bằng cách lập trình tương ứng. Nó được sử dụng để nuôi cấy vi khuẩn trong môi trường nước canh ở nhiệt độ cụ thể.

17. Quầy thuộc địa Quebec:

Trong việc liệt kê vi khuẩn trong các mẫu, người ta cho rằng một loại vi khuẩn duy nhất tạo ra một khuẩn lạc có thể nhìn thấy được, khi được trồng trên một đĩa môi trường dinh dưỡng đông đặc. Do đó, bằng cách đếm số lượng khuẩn lạc, số lượng vi khuẩn trong một mẫu có thể được ước tính.

Đôi khi, các thuộc địa rất nhỏ và quá đông đúc gây khó khăn cho việc đếm. Việc đếm trở nên dễ dàng, khi một bộ đếm tay cơ học, được gọi là bộ đếm thuộc địa Quebec (Hình 3.11), được sử dụng. Nó chia tấm thành nhiều phần vuông và các khuẩn lạc được phóng to 1, 5 lần bằng kính lúp, giúp việc đếm dễ dàng.

18. Bộ đếm thuộc địa điện tử:

Bộ đếm thuộc địa điện tử có hai loại:

(1) Bộ đếm thuộc địa điện tử cầm tay và

(2) Bộ đếm thuộc địa điện tử để bàn.

Bộ đếm thuộc địa điện tử cầm tay là bộ đếm thuộc địa kiểu bút với điểm đánh dấu bằng mực. Để đếm các khuẩn lạc của vi khuẩn phát triển trong đĩa petri, nó được giữ ở vị trí đảo ngược, để các khuẩn lạc được nhìn thấy qua bề mặt dưới cùng của đĩa petri.

Các khuẩn lạc được đánh dấu bằng cách chạm vào bề mặt thủy tinh của đĩa petri bằng đầu nỉ của quầy thuộc địa. Do đó, mỗi thuộc địa được đánh dấu bằng một dấu chấm được làm bằng mực của đầu nỉ trên bề mặt đáy của đĩa petri. Trong một chuyển động duy nhất, bộ đếm thuộc địa điện tử đánh dấu, đếm và xác nhận bằng âm thanh tiếng bíp.

Số lượng khuẩn lạc tích lũy được hiển thị trên màn hình LED bốn chữ số. Trong trường hợp máy đếm khuẩn lạc điện tử để bàn, đĩa petri chứa khuẩn lạc của vi khuẩn được đặt trên một sân khấu được chiếu sáng và thanh đếm được ấn xuống. Số lượng khuẩn lạc chính xác được hiển thị ngay lập tức trên đầu đọc kỹ thuật số.

19. Máy khuấy từ:

Trong quá trình chuẩn bị các dung dịch, một số hóa chất đòi hỏi phải khuấy trong thời gian dài, để được hòa tan trong một số dung môi. Máy khuấy từ được sử dụng để hòa tan các chất đó một cách dễ dàng và nhanh chóng. Một nam châm nhỏ được phủ lớp tanh, được gọi là 'thanh khuấy', được đặt vào một thùng chứa dung môi và chất tan.

Sau đó, thùng chứa được đặt trên bệ của máy khuấy từ, bên dưới là một nam châm quay với tốc độ cao bởi một động cơ. Bị thu hút bởi nam châm quay, nam châm được phủ bằng tanh quay bên trong thùng chứa và khuấy các vật chứa. Bây giờ, chất tan hòa tan nhanh chóng.

Lớp phủ tanh ngăn không cho nam châm phản ứng với dung dịch tiếp xúc với nó. Sau khi hòa tan hoàn toàn, nam châm được phủ bằng chất tanh được loại bỏ khỏi dung dịch bằng một thiết bị thu hồi dài, được gọi là 'thiết bị thu hồi thanh khuấy'.

20. Máy tạo âm thanh:

Nó được sử dụng để phá vỡ các tế bào bằng sóng tần số cao.

21. Máy trộn xoáy:

Nó là một dụng cụ được sử dụng để trộn kỹ chất lỏng trong ống nghiệm. Nó có một cánh quạt, tốc độ có thể được kiểm soát. Trên đầu cánh quạt là đỉnh cao su xốp. Khi đáy của ống nghiệm được ấn vào đỉnh cao su xốp này, rôto bắt đầu quay, do đó quay đáy ống nghiệm ở tốc độ cao.

Do lực hướng tâm, dung dịch được trộn kỹ. Nó đặc biệt hữu ích trong quá trình pha loãng nối tiếp trong việc liệt kê vi khuẩn, cần sự đình chỉ đồng nhất của các tế bào vi khuẩn.

21. Buồng dòng chảy:

Nó là một buồng (Hình 3.12) được sử dụng để chuyển vô trùng các vật liệu tiệt trùng, cũng như để cấy vi khuẩn. Các hạt bụi trôi nổi trong các vi khuẩn cảng không khí. Những hạt bụi chứa đầy vi khuẩn này có thể xâm nhập vào môi trường đã khử trùng và làm nhiễm bẩn chúng, khi chúng được mở trong thời gian ngắn trong quá trình cấy vi khuẩn hoặc chuyển từ vật chứa này sang vật chứa khác.

Để khắc phục điều này, khi tiêm chủng được thực hiện trong không khí mở, không khí của khu vực tiêm chủng nhỏ được khử trùng bằng ngọn lửa của lò đốt bunsen. Không khí nóng trở thành ánh sáng và di chuyển lên trên, do đó ngăn các hạt bụi rơi xuống môi trường trong quá trình mở ngắn.

Để tiếp tục giảm nguy cơ ô nhiễm bởi không khí chứa vi khuẩn, một buồng dòng chảy tầng được sử dụng. Nó là một buồng hình khối lắp kính. Một máy thổi khí thổi không khí từ xung quanh và đưa nó qua bộ lọc HEPA (Bộ lọc không khí hiệu quả cao), để làm cho nó không có bụi (không có vi khuẩn).

Không khí không có vi khuẩn này đi qua buồng theo kiểu tầng và đi ra từ buồng qua cửa trước mở. Luồng không khí này của không khí không có vi khuẩn từ buồng ra bên ngoài thông qua cửa mở ngăn không khí bên ngoài xâm nhập vào buồng.

Do đó, buồng không bị nhiễm vi khuẩn có trong không khí bên ngoài, mặc dù cánh cửa được giữ mở trong quá trình cấy hoặc truyền phương tiện. Một đèn UV được lắp bên trong buồng khử trùng buồng trước khi hoạt động.

Nó có một nền tảng bằng thép không gỉ với việc cung cấp kết nối ống khí cho đầu đốt bunsen. Trước khi sử dụng, nền tảng được làm sạch và khử trùng bằng lysol, đầu đốt bunsen được kết nối và sau đó cửa kính được đóng lại.

Đèn UV được bật trong 10 phút để khử trùng môi trường bên trong buồng và sau đó tắt. Không bao giờ nên mở cửa kính khi bật đèn UV, vì đèn UV có tác dụng bất lợi cho da và thị lực. Quạt được bật và sau đó cửa kính được mở.

Bây giờ, đầu đốt bunsen được thắp sáng và truyền phương tiện hoặc tiêm truyền được thực hiện trong buồng vô trùng. Nếu các vi khuẩn cực kỳ nguy hiểm phải được xử lý, một buồng dòng chảy tầng với găng tay chiếu vào buồng từ cửa kính phía trước được sử dụng, vì việc tiêm chủng phải được thực hiện để giữ cho cửa trước đóng lại.

22. Bộ đếm tế bào điện tử:

Nó được sử dụng để đếm trực tiếp số lượng vi khuẩn trong một mẫu chất lỏng nhất định. Một ví dụ về bộ đếm tế bào điện tử là 'bộ đếm Coulter'. Trong thiết bị này, việc đình chỉ các tế bào vi khuẩn được phép đi qua một phút, qua đó một dòng điện chạy qua.

Điện trở tại lỗ được ghi lại bằng điện tử. Khi một tế bào đi qua lỗ, không dẫn điện, nó sẽ tăng sức đề kháng trong giây lát. Số lần kháng thuốc tăng trong giây lát được ghi lại bằng điện tử, cho biết số lượng vi khuẩn có trong mẫu chất lỏng.

23. Thiết bị lọc màng:

Một số chất như urê tan rã và mất tính chất ban đầu, nếu được khử trùng bằng nhiệt. Các chất này được khử trùng bằng thiết bị lọc màng. Trong thiết bị này, dung dịch của chất cần khử trùng được lọc qua bộ lọc màng, không cho phép các tế bào vi khuẩn đi qua. Quá trình lọc được thực hiện dưới áp suất hút để tăng tốc độ lọc (Hình 2.19, trang 30).

24. Kính hiển vi:

Các loại kính hiển vi khác nhau được sử dụng để quan sát trực quan về hình thái, sự vận động, nhuộm màu và phản ứng huỳnh quang của vi khuẩn.

25. Máy tính:

Máy tính thường được sử dụng để phân tích kết quả. Chúng cũng được sử dụng để xác định vi khuẩn dễ dàng trong vòng vài giờ. Mặt khác, xác định vi khuẩn là một quá trình tẻ nhạt và mất nhiều ngày cùng nhau để xác định một loài vi khuẩn.

Các máy tính được sử dụng để nhận dạng vi khuẩn là Apple II, IBM PC và TRS-80 và các biến thể hiện đại của chúng. Mỗi nhân viên nghiên cứu của phòng thí nghiệm nên được cung cấp một máy tính, cùng với thiết bị internet.

26. Máy quang phổ:

Nó là một công cụ để đo lường sự khác biệt về cường độ màu của các giải pháp. Một chùm ánh sáng có bước sóng cụ thể được truyền qua dung dịch thử và lượng ánh sáng hấp thụ (hoặc truyền) được đo bằng điện tử.

Máy quang phổ nhìn thấy đơn giản có thể truyền ánh sáng với bước sóng trong phạm vi khả kiến, trong khi đó máy quang phổ kế có thể nhìn thấy bằng tia cực tím có thể truyền ánh sáng có bước sóng trong vùng tử ngoại cũng như trong phạm vi nhìn thấy. Trong phòng thí nghiệm vi sinh, nó được sử dụng để đếm trực tiếp vi khuẩn trong huyền phù cũng như cho các mục đích khác.

27. Thiết bị điện:

Sự biến động của điện áp trong phòng thí nghiệm là một trong những lý do quan trọng nhất, làm giảm tuổi thọ của thiết bị và đôi khi làm hỏng chúng. Do đó, tất cả các thiết bị nhạy cảm với điện áp phải được cung cấp các thiết bị bảo vệ điện áp như bộ ổn định, bộ ổn định servo hoặc máy biến điện áp không đổi (CVT) theo khuyến nghị của nhà sản xuất thiết bị.

Máy tính, cân bằng và một số thiết bị tinh vi nên được kết nối thông qua nguồn điện liên tục (UPS), vì bất kỳ sự cố nào trong nguồn điện trong quá trình hoạt động có thể làm hỏng nghiêm trọng một số bộ phận nhạy cảm của chúng.

Phòng thí nghiệm nên có một máy phát công suất cao để cung cấp dòng điện cho toàn bộ phòng thí nghiệm trong trường hợp mất điện. Điều này là do, sự cố mất điện không chỉ khiến các hoạt động của phòng thí nghiệm rơi vào bế tắc mà còn mang đến những thay đổi không thể đảo ngược trong các mẫu được lưu trữ trong tủ lạnh và tủ lạnh sâu.

28. Hệ thống nhận dạng vi khuẩn tự động:

Nó là một công cụ được sử dụng để xác định vi khuẩn được máy tính hỗ trợ tự động (Hình 3.13 và 3.14). Phương pháp xác định vi khuẩn thông thường rất dài và cồng kềnh.

Nó chủ yếu liên quan đến nhuộm màu, kiểm tra khả năng vận động, đặc điểm văn hóa, một loạt các xét nghiệm sinh hóa và cuối cùng là tìm kiếm tên của vi khuẩn trong 'Sổ tay vi khuẩn xác định Bergey' bằng cách kết hợp các kết quả với các kết quả có sẵn trong hướng dẫn. Hệ thống nhận dạng vi khuẩn tự động tự động xác định vi khuẩn trong thời gian rất ngắn.

Hệ thống, như VITEK 2 (Hình 3.14) sử dụng thẻ dùng một lần. Một thẻ là cần thiết để xác định một vi khuẩn. Hệ thống có thể chứa một loạt các thẻ, có thể được sắp xếp trên một băng cassette, do đó cho phép xác định một số vi khuẩn tại một thời điểm.

Mỗi thẻ có một vài hàng giếng. Thông thường có 8 hàng 8 giếng mỗi (8X8 = 64 giếng). Các giếng chứa phương tiện khử nước khác nhau cần thiết cho các xét nghiệm sinh hóa khác nhau. Một ống mao dẫn được cố định vào mỗi thẻ, hút chất lơ lửng của vi khuẩn được xác định và phân tán vào tất cả các giếng.

Môi trường khử nước trong giếng trở nên ngậm nước nhờ chất lỏng huyền phù, do đó cho phép vi khuẩn phát triển. Sau một thời gian ủ quy định, màu sắc thay đổi trong tất cả các giếng được ghi lại tự động trong hệ thống.

Kết quả của sự thay đổi màu sắc đi đến một máy tính được gắn vào hệ thống. Máy tính tự động so sánh kết quả với những kết quả có sẵn trong thư viện của nó cho các vi khuẩn khác nhau và cuối cùng đưa ra tên của vi khuẩn với xác suất xác định.

Để xác định, các vi khuẩn nhất định, được trồng dưới dạng khuẩn lạc phân lập trên đĩa hoặc nuôi cấy thuần túy được trồng trên xiên. Một ổ vi khuẩn được chuyển vô trùng vào dung dịch muối vô trùng trong ống nghiệm và đình chỉ vi khuẩn.

Việc đình chỉ phải chứa một mật độ vi khuẩn theo quy định, như được xác định bằng mật độ kế. Ống nghiệm được cố định vào hộp cát sét và một thẻ được cố định gần nó, sao cho đầu ống mao dẫn của thẻ vẫn chìm sâu trong huyền phù.

Một số ống nghiệm và thẻ như vậy được cố định vào mỗi băng, tùy thuộc vào số lượng vi khuẩn được xác định. Các cassette được đặt trong buồng chân không của hệ thống. Một chân không cao được tạo ra bên trong buồng, điều này buộc vi khuẩn bị đình chỉ bị hút vào các ống mao quản và phân tán vào các giếng của thẻ.

Các cassette được lấy ra và đưa vào bên trong buồng ủ và phân tích. Ở đây, các ống mao dẫn được cắt và các đầu cắt được niêm phong tự động. Sau đó, quá trình ủ bắt đầu ở nhiệt độ quy định trong một khoảng thời gian quy định, được lập trình bởi bảng điều khiển. Trong thời gian ủ, cứ sau 15 phút, mỗi thẻ sẽ tự động chuyển đến đầu đọc màu, đọc các thay đổi màu trong giếng và ghi lại chúng.

Các kết quả được ghi vào máy tính, tự động so sánh chúng với các kết quả, có sẵn trong thư viện của nó cho các vi khuẩn khác nhau. Cuối cùng, nó đưa ra tên của vi khuẩn với xác suất xác định. Các thẻ được sử dụng rơi vào buồng xử lý chất thải của hệ thống để loại bỏ và xử lý cuối cùng sau khi khử trùng.

Các hệ thống nhận dạng vi khuẩn tự động nổi tiếng là VITEK 2 và API. Mặc dù VITEK 2 hoạt động theo nguyên tắc trên, hệ thống API (Lập chỉ mục hồ sơ phân tích) (Hình 3.13) sử dụng một phương pháp hơi khác để nhận dạng vi khuẩn tự động, bao gồm tiêm chủng thủ công và ủ bên ngoài.

29. Máy đo nhiệt độ PCR, Máy ly tâm lạnh, Máy ly tâm siêu âm, Sắc ký khí (GC), Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC), Sắc ký lớp mỏng (TLC), Sắc ký giấy, Sắc ký cột và Điện di cột:

Đây là những dụng cụ được sử dụng để phân lập, tinh chế và xác định các chất sinh hóa, chẳng hạn như DNA của vi khuẩn, plasmid, độc tố vi sinh vật, vv Phản ứng chuỗi polymerase (PCR) là một công cụ quan trọng trong phương pháp dựa trên axit nucleic. Nó là một công việc trong các phòng thí nghiệm vi sinh và công nghệ sinh học hiện đại.